Effect of Arginine Supplementation on Protein Synthesis Pathways in HepG2Cells ViaiTRAQ Assay

【摘要】Argininesupplementationrequiredforadequatenutrientrequirementtostimulateanabolicprocesses,suchasproteinsynthesisandproliferation.ThepurposeofthisstudyistodiscovertheeffectsupplementationofarginineonidentifiedproteinthatfunctionsinpathwayofproteinsynthesisinHepG2cells.HepG2cellsandargininewereusedinthisstudyasthemainmaterials.Themainmethodsthatwereusedarecellculture,iTRAQandwesternblot.Thesoftwarepackageswereutilizedfordataanalysis:MascotforidentificationandquantificationofdifferentiallyexpressedproteinsandStringtoprovideinsightintoCOGfunction.TheresultofargininesupplementationviaiTRAQassayshowedthattotaldifferentiallyexpressedproteinonresupplementationgroupishigherthandeprivationgroupandmostofproteinthatdetectedisup-regulatedprotein.OndeprivationgroupfounddecreasedactivityofAMPKonmTORpathway,AMPKandAtg8activityinregulationofautophagypathway.DecreasingAMPKwillincreasemTORactivitythatwillinhibitautophagyandinduceproteinsynthesisinHepG2cells.ForGOanalysiscanbeknownthattheidentifiedproteinsrepresenttherelevanceandvarietyofmolecularfunctionsonbindingandcatalyticactivity,actsincellularandmetabolicprocess,andlargenumberfoundlocatedincellandorganelleonallgroups.Theimportantproteinthatfindinthisstudyispyroline-5-carboxylatedehydrogenaseconvertsglutamyl-y-semialdehydeintoglutamate.Glutamateistheresultofarginineconversion,whichhasroleinproteinformation.ValidationbyWesternBlotanalysisshownduring8hargininedeprivationdecreaseslevelofp62andLC3,butincreaseS6KandphosphorylationofmTORby4mMarginineresupplementationinHepG2cells.Inconclusion,arginineresupplementationwillincreaseidentifiedprotein,inhibitautophagy,andcanusedforproteinsynthesisviaincreasingmTORactivityinHepG2cells.
【作者】瑞娜（RetnoLestari）；
【导师】晏向华；JOELALACHMADI；AGUNGPURNOMOADI；
【作者基本信息】华中农业大学，动物营养与饲料科学，2014，硕士
【关键词】arginine；proteinsynthesis；HepG2cells；iTRAQ；

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